<code id="ze2yw"></code><th id="ze2yw"><option id="ze2yw"></option></th>
    <code id="ze2yw"><em id="ze2yw"><optgroup id="ze2yw"></optgroup></em></code>
    <code id="ze2yw"><small id="ze2yw"><samp id="ze2yw"></samp></small></code>
      <th id="ze2yw"><option id="ze2yw"></option></th>
      <strike id="ze2yw"></strike>
        <code id="ze2yw"></code>

        资讯

        INFORMATION

        您现在的位置::首页 > 资讯管理 > 行业要闻 > 行业百态

        细胞培养方法步骤

        来源: 上海博湖生物科技有限公司 >> 进入该公司展台 2021/11/15 15:34:30 已浏览:
        导读:细胞培养方法步骤

        培养方法如下:
        1、将细胞稀释到1000个细胞/mL,接种到24孔板,每孔1ml。
        2、接种后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。
        3、每隔3天跟换1次培养液,保持G418浓度不变。
        4、选择出在10~14天内使全部死亡的G418浓度来进行下一步的筛选试验。由于每种细胞对G418的敏感性不同,一般变动在100ug/ml~1000ug/ml范围。
        培养步骤:
        1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将有细胞悬液加入培养瓶中培养*(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养*。第二天换液并检查细胞密度。
        2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
        1)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

        (1)、 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

        (2)、 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

        (3)、轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
        (4)、 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
        2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
        方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
        方法三:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
        细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入到冻存液中。
        我公司提供原代细胞、细胞系、细胞株和菌种,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献培养条件。纯度可达 90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

        您认为该新闻

        很好,强力推荐给其他网友

        还行,值得推荐

        一般,不值得推荐

        较差,根本不用看

        • 关注本网官方微信公众号 随时阅读专业资讯

        • 征稿邮箱:info@testmart.cn

        版权与免责声明

        • 凡本网注明“来源:仪器仪表交易网”的所有作品,均为仪器仪表交易网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:仪器仪表交易网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
        • 本网转载并注明自其它来源(非仪器仪表交易网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
        • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。

        爆品推荐

        推荐资讯

        首页| 关于我们| 联系我们| 友情链接| 广告服务| 会员服务| 付款方式| 意见反馈| 法律声明| 服务条款

        亚洲欧洲无码一区二区三区,国产三级日本三级日产三级,免费一区二区无码东京热