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        PCR技术的主要步骤

        来源: 上海西格生物科技有限公司 >> 进入该公司展台 2021/11/23 14:28:04 已浏览:
        导读:PCR技术的主要步骤

        PCR技术的主要步骤如下:

        1、dna变性:(90℃-96℃):在热作用下,双链dna模板的氢键断裂,行程单链dna。
        2、退火:(60℃-65℃):体系温度降低,引物与dna模板结合形成部双链。

        3、延伸:(70℃-75℃:以dntp为原料,在taq酶的作用下(72℃左右),以dntp为底物,从引物的3′端开始,从5′→3′端延伸,用模板法合成互补dna链。

        每一个周期都被变性、退火和延长,使dna含量加倍。现在有些pcr即使taq酶活性不是*的,也能在很短的时间内复制,因为扩增区域很短。

        因此,可改为两步法,即在60℃-65℃同时进行退火和延伸,以减少一次升温和降温过程,提高反应速度。


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